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ELISA 檢測(cè)試劑盒屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么 ELISA 檢測(cè)試劑盒反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。

溫育常采用的溫度有 43 ℃、37 ℃、室溫和 4 ℃（冰箱溫度）等。37 ℃ 是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立 ELISA 方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在 37 ℃ 經(jīng) 1～2 小時(shí)，產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在 43 ℃ 進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應(yīng) 4 ℃ 更為好，在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中，以形成 zui 多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng)，在 ELISA 檢測(cè)試劑盒中一般不予采用。

Elisa 試劑盒保存條件：

1) 未開(kāi)封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意，收到試劑盒后請(qǐng)盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液 A、檢測(cè)溶液 B 以及 96 孔板保存于 -20 ℃。

2) 使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于 - 20 ℃，避免潮濕。